
体内样品处理
考点1:体内样品处理的常用方法
(1)去除蛋白质法
(2)缀合物水解法
(3)萃取分离法
(4)化学衍生化法
考点2:去除蛋白质的方法:
※ 蛋白质沉淀法
√ 加与水混溶的有机溶剂脱水
√ 加入强酸生成不溶性盐
√ 加无机盐盐析
※ 蛋白分解法——蛋白水解酶(枯草菌溶素)
考点3:缀合物水解法
※ 酸水解(HCl):简便、快速,但专一性差
※ 酶水解:β-葡萄糖醛酸苷酶、硫酸酯酶、两者混合酶,专属性高
考点4:分离纯化与浓集常用方法
※ 液-液萃取——选用与水不相混溶的有机溶剂进行提取
※ 离子对萃取法
※ 固相萃取法——利用柱色谱进行分离
考点5:化学衍生化法
衍生化目的
● 增加组分的稳定性
● 改善被测组分的色谱行为
● 增加被测物的检测灵敏度和选择性
● 提高对光学异构体分离的能力
衍生化方法
● GC——硅烷化、酰化、烷基化
● HPLC——荧胺、丹酰氯、邻苯二醛(柱前衍生化、柱后衍生化)
● 手性衍生化法
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