北京雷根生物技术有限公司 www.leagene.com 巴比妥缓冲液(5×,pH7.4) 简介: 巴比妥(Barbital)商品名为佛罗拿(Veronal),又称巴比通(Barbitone),是一种长效类催眠剂,具有镇静、催眠、抗惊厥及抗癫痫等作用。分子式为C12H12N2O3,分子量为232.24,微溶于水,溶于热水和乙醇,易溶于碱性溶液。 Leagene巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)主要由巴比妥、巴比妥钠、氯化钠等组成,pH值为7.4,常用于血清总补体活性(CH50)测定中制备绵羊红细胞悬液,亦可以用于制备致敏性绵羊红细胞等。该试剂为5×储存液,临用前稀释至1×。 组成: 自备材料: 1、绵羊血 2、抗凝剂 3、离心机 4、分光光度计 5、溶血素 6、水浴锅或温箱 编号 IH0075 名称 Storage 巴比妥缓冲液(5×,pH7.4) 使用说明书 100ml 4℃ 1份 操作步骤(仅供参考): 1、 巴比妥缓冲工作液的配制:临用前,按巴比妥缓冲液(5×,pH7.4):蒸馏水或去离子水=4:1稀释,即取1份巴比妥缓冲液(5×,pH7.4)和4份蒸馏水或去离子水充分混合,即为巴比妥缓冲工作液,也就是1×巴比妥缓冲液。 2、绵羊红细胞的制备 ⑴ 取绵羊颈静脉血,立即加入等量的抗凝剂,充分混匀,4℃保存,2~3周内有效。 ⑵ 加入适量的1×巴比妥缓冲液,2500g离心5min,弃上清。 ⑶ 重复步骤(2)2次,以便清洗干净。 ⑷ 取2ml上述绵羊红细胞溶液,加入98ml 1×巴比妥缓冲液,配制成2%的绵羊红细胞悬液。 ⑸ 为了使2%的绵羊红细胞悬液标准化,一般吸取0.2ml 2%的绵羊红细胞悬液加入5ml 1北京雷根生物技术有限公司 www.leagene.com ×巴比妥缓冲液,用分光光度计测定A542nm处吸光值,以后每次试验均参照该值校正绵羊红细胞的浓度。 3、 致敏绵羊红细胞的制备 ⑴ 用1×巴比妥缓冲液将已知效价的溶血素稀释至2单位。 ⑵ 取上述2单位的溶血素、2%的绵羊红细胞悬液等量混合。 ⑶ 37℃孵育20min,并每隔几分钟振摇一次,使绵羊红细胞致敏。 注意事项: 1、制备细胞悬液时应根据实验具体需要操作。 2、离心步骤尽量在4℃离心机上操作。 3、稀释成1×巴比妥缓冲液,应尽量在24h内使用。 4、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期: 12个月有效。 相关: 编号 名称 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁) ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer) 醋酸洋红染色液 普鲁士蓝染色试剂盒(核固红法) SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(5×) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA比色法) CC0007 CS0001 DA0045 DJ0001 PE0025 TO1013 本文来源:https://www.wddqw.com/doc/5ff6b2eeae51f01dc281e53a580216fc700a5396.html