酵母菌基因组DNA的提取实验方法

时间：2022-07-27 20:12:16 阅读：最新文章文档下载

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酵母菌基因组DNA的提取实验方法一例

酵母菌基因组DNA的提取所需试剂：

SE缓冲液（1M山梨醇，0.1MEDTA pH7.5）；溶菌酶（50mg/ml）；20％PVP；蛋白酶K缓冲液（10mM Tris pH7.6 0.5% SDS 1mM EDTA）；

酵母菌基因组DNA的提取实验的操作过程 1、1.5ml，对数生长期细菌细胞 2、离心，12000rpm,1-2min

3、沉淀，溶于590ulSE缓冲液中混匀+10ul溶菌酶37℃,1hr 4、离心，12000rpm,8-10min

5、沉淀，溶于100μL，0.5μl蛋白酶Ｋ，混匀，37℃,1hr

6、加入1.2ml的CTAB/NaCL,200μl20%PVP 混匀 65℃,30min等体积酚/氯仿/异戊醇混合液,混匀, 7、离心,12000rpm,4-5min