热休克蛋白60基因定点诱变导致其在细胞内定位的改变 王银;游丽琴;李云鸿;滕鹏;成文静;张玉梅;苗珍花;蒲静;马娇;张楠 【期刊名称】《宁夏医科大学学报》 【年(卷),期】2011(033)007 【摘 要】目的 研究将热休克蛋白60(HSP60)蛋白序列中第70位的丝氨酸(serine)突变为丙氨酸(alanine)后,HSP60在细胞内定位的改变.方法 将PrC/CMV - HSP60P1重组质粒中HSP60P1编码第70位丝氨酸的碱基定点诱变为编码丙氨酸的碱基序列,转染至小胶质细胞BV -2细胞株中表达.细胞经10h缺氧处理后,裂解细胞,应用差速离心方法 分离细胞膜、细胞质和线粒体,应用Western- blot方法 检测各细胞器中HSP60的含量.结果 在转染未诱变PrC/CMV - HSP60P1质粒的细胞中,正常情况下,HSP60大部分分布在线粒体,少部分在胞浆,细胞膜中未见表达；缺氧刺激后,HSP60在细胞膜、胞浆和线粒体中均有表达；然而70位丝氨酸突变为丙氨酸后,只观察到HSP60在胞浆和线粒体中的表达,而在细胞膜上未见表达.结论 作为磷酸化位点的Serine70对HSP60在细胞内的定位具有关键作用. 【总页数】4页(P609-611,618) 【作 者】王银;游丽琴;李云鸿;滕鹏;成文静;张玉梅;苗珍花;蒲静;马娇;张楠 【作者单位】宁夏医科大学科学技术中心,银川750004;宁夏医科大学基础医学院神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学科学技术中心,银川750004;宁夏医科大学基础医学院神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院神经生物系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004;宁夏医科大学基础医学院医用化学系,银川750004 【正文语种】中 文 【中图分类】R345.05 【相关文献】 1.pEGFP-HuR真核表达载体的构建及热休克刺激后细胞内定位的改变 [J], 于文燕;艾斯克·吐拉洪;周宁;买买提祖农·买苏尔;罗海华;张传丽;孙宏卫;孙湛;马小娟 2.缺氧缺血新生鼠脑组织谷氨酸及脑细胞内钙改变和降钙素基因相关肽的保护作用 [J], 唐兰芬;王优;黄宇戈;黄秀兰;侯敢 3.科学家揭示人类基因组“暗物质”——可帮助定位导致疾病的基因突变 [J], 4.人体细胞内线粒体基因变异可导致衰老 [J], 巴木;文仪 5.应力导致的细胞内信号转导和基因表达变化 [J], 尚娟芳;王远亮;唐丽灵;牛旭锋 因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买 本文来源：https://www.wddqw.com/doc/094cc9bd4593daef5ef7ba0d4a7302768f996f65.html